domingo, 5 de junio de 2011

DETERMINACION DE ACIDO URICO EMPLEANDO EL ESPECTROFOTOMETRO.

introduccion:
El ácido úrico es el resultado final del metabolismo de las purinas (partes de DNA y RNA). La mayor parte del ácido úrico se excreta por el riñón, y algo por el sistema intestinal. Cuando aumenta la destrucción de los tejidos , el ácido úrico aparece elevado en sangre, aunque la causa más común de su elevación es la gota.
conceptos
PRUEBA DE ACIDO URICO: Es un análisis que se realiza por separado o en una petición general de bioquímico en la sangre. Mide la cantidad (concentración) del ácido úrico presente en la sangre.
ESPECTROFOTOMETRO:  sirve para medir, en función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones.

Materiales:
1.-  materiales para puncion venosa ( jeringa, torundas, ligadura, tubo sin anticoagulante) o materiales para realizar la puncion con vacutainer
2.- espectrofotometro
3.-tubos de ensaye (para depositar la muestra y reactivos)
4.-pipeta
5.-baño maria
6.- reactivo de acido urico
7.- reactivo de estandar
procedimiento 

 1.- realizar la puncion sanguinea para obtener la muestra de sangre

si no sabes realizar puncion venosa con vacutainer reproduce este video


2.- introducir la muestra al tubo de tapa roja (sin anticoagulante) y seguidamente introducir a la centrifuga a 3500 RPM por 5 minutos


3.- rotular 3 tubos de ensaye como: 
      BL ( blanco, sirve para calibrar el espectrofotometro, solo contiene reactivo)
     ST ( estandar, sirve como valor dereferencia, contiene reactivo de acido urico y reactivo estandar)
     M   ( es la muestra dara el valor de acido urico presente en la sangre)
  4.- agregar con la pipeta 1ml de reactivo de acido urico a todos los tubos de ensaye rotulados


5.- agregar .025 militros de reactivo de estandar pero solo al tubo marcado como ST (estandar)
6.-sacar la muestra de sangre de la centrifuga y separar el suero sanguineo en un tubo de ensaye limpio

7.- pipetar .025 militros del suero y vertirlo solo sobre el tubo rotulado como M (muestra)


8.- incubar los 3 tubos rotulados en el baño maria durante 10 minutos a 37 grados celcius


9.- leer las absorvancias del ST & M a 555 nanometros, ajustando a cero el espectrofotometro con el BL



Referencias= Mujeres= 2.5 -6.8 mg/dl
                     Hombres=3.6 – 7.7 mg/dl








 que practica tan larga ahora diviertete un momento

DETERMINACION DE TP & TPT EMPLEANDO BAÑO MARIA

introduccion:
Los factores intrínsicos de la coagulación se activan en presencia de tromboplastina cálcica en plasma citratado; se mide el tiempo transcurrido después de la adición del cloruro calcio (CaCl2) hasta la formación de coagulo de fibrina.
El tiempo de protombina (TP) o Tiempo de quick ha servido para determinar trastornos de coagulación, TP es la determinación más frecuente junto con la APTT.

CONCEPTOS:
TP: (Tiempo de protrombina): Es un examen de sangre que mide el tiempo que le toma a la porción líquida de la sangre (plasma) coagularse.

TPT: (Tiempo de tromboplastina parcial activado): Es un examen de sangre que examina el tiempo que le toma a la sangre coagularse y puede ayudar a establecer si una persona tiene problemas de sangrado o coagulación.

BAÑO MARIA : es el que implica el calentamiento indirecto, por convección térmica del medio de agua.


                                                 Materiales necesarios:
  •      Vacutainer. (es necesario para realizar la puncion sanguinea)
·           El baño maría. (para incubar la muestra)

·         Centrifuga. (para separar la sangre por fases de densidad)

·         Tubos de ensaye. (almacenar suero y la muestra)

·         Pipeta 1mil/10. (pipetiar losreactivos y el suero)

·         Tubo de tapón azul que contiene anticoagulante citrato de sodio 38%.
       ( es necesario para obtener plasma en veces de suero al momento de centrifugar)

·         Reactivo de TP.

·         Reactivo de TPT.

·         CaCl2.

 procedimiento de TP:       


1.- realizar la puncion sanguinea con el Vacutainer para obtener la muestra de sangre
si no sabes como realizar la puncion sanguinea reproduce este video




2.- introducir la muestra en la cantrifuga a 3500  RPM por 5 miutos para obtener el plasma sanguineo

3.-separar 100 Ml (microlitros) de plasma con ayuda de la pipeta  y depositar  en un tubo de ensaye 



4.- seguidamente agregar 200 ML de reactivo de PT y tomar el tiempo con un valor de referncia de 13 segundos

    procedimiento de TPT       


1.-realizar la puncion sanguinea con el Vacutainer para obtener la muestra de sangre



2.- introducir la muestra en la cantrifuga a 3500  RPM por 5 miutos para obtener el plasma sanguineo


3.-separar 100 Ml (microlitros) de plasma con ayuda de la pipeta  y depositar  en un tubo de ensaye 

4.- colocar 100 Ml de reactivo de TPT en el mismo tubo

5.- meter el tubo de ensaye a incubar en el baño maria durante 3 minutos



6.- al sacarlo inmediatamente agregar 100 Ml de cloruro de calcio y medir el tiempo en que se forma el coagulo de fibrina. con un valor de referencia de 37 segundos




                   

DESPEDIDA

Esperamos que este blog te haya sido util para comprender la utilidad de los equipos de laboratorio asi como la funcion  e importancia de cada uno de ellos. Por favor si tienen alguna sugerencia, queja o duda no duden en dejar sus comentarios. Gracias por visitarnos

al final la diversion

por si no encontrastes algun juego aqui tenemos la recopilacion de los links por favor disfrutalos

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