lunes, 6 de junio de 2011

APLICACION DE ESTERILIZACION POR CALOR HUMEDO EMPLEANDO LA AUTOCLAVE

Introduccion:

Con la autoclave, la presión elevada permite que el agua alcance temperaturas superiores a su punto de ebullición. La temperatura y el vapor actuando conjuntamente producen la coagulación de las proteínas de los microorganismos, entre ellas las esenciales para la vida y la reproducción de estos, llevando así a su destrucción.

conceptos
Autoclave: Una autoclave es un recipiente metálico de paredes gruesas con un cierre hermético que permite trabajar a alta presión para realizar una reacción industrial, una cocción o una esterilización con vapor de agua.
Esterilizacion: Es la eliminación de toda forma de vida de un medio o material, lo que se lleva a cabo generalmente por medios físicos
Calor humedo:El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas.
Estos efectos se debe principalmente a dos razones:
*El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua.
*El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el
aire.

procedimiento

1.- Envolver los materiales a esterilizar con papel estrasa



2.- Si se esterilizara algun matraz de erlenmeyer se tiene que fabricar un tapon para colocarselo
       pasos para fabricar el tapon:
  • se escoje la cantidad necesria de algodon (esto dependera del tamaño del matraz)
  • se envuelve el algodon con la gasa
  • se refuerza con cinta
  • se verifica que sea del tamaño adecuado



3.-    Asegurarse de que haya un nivel de agua en el autoclave aceptable, debe ser entre 3 a 4 litros de agua. si no hay ese nivel de agua es necesario que se suministre




4.-Introducir dentro el material a esterilizar, procurando que quede bien colocado para evitar algún problema.


5.-Cerrar la puerta, ajustando las perillas mariposa, esto debe hacer que la autoclave quede herméticamente cerrado.

6.-  Abrir la valvula de salida de vapor y encender la fuente de energía de la autoclave (que debe ser 120 v conectado a tierra).

7.- A medida que suba la temperatura del agua, empezara a salir una mezcla de vapor-aire por la válvula de salida, dejar que escape esta mezcla hasta que salga un flujo constante de vapor, a esto se le llama purgar la autoclave.

8.-  Una vez purgado el autoclave, cerrar la válvula y dejar que la presión suba hasta las 15 libras por pulgada cuadrada (vigile el manómetro), lo que proporcionara una temperatura de 121°c.

9.-Una vez hecho esto, tomar el tiempo – teniendo 15 minutos para cristalería y 20 para telas.

10.- Transcurrido el tiempo, apague la fuente de energía, y deje que el autoclave se enfrié sola, hasta que la presión haya bajado a 0 libras.

11.-  Abra la autoclave y retire el material.

OBSERVACION DE MUESTRAS PARA USO DEL MICROSCOPIO OPTICO

introduccion: El uso del Microscopio se ha generalizado tanto, son tantas las ciencias a las que es menester, que su uso mismo en la actualidad no es tan simple, incluso solamente hablando del microscopio óptico; y es por razón de que la inmensa cantidad de objetos y múltiples sustancias a investigarse, requieren de un procesamiento adecuado y propio para su mejor enfoque y visualización.

conceptos:


 

Microscopio óptico: Presenta distintos tipos de lentes que constituyen la parte óptica; las lentes producen la refracción de la luz y forman imágenes de mayor tamaño que el objeto que se observa.

La parte mecánica: permite el funcionamiento y ajuste de los elementos de la parte óptica.
El microscopio necesita luz para funcionar:
por ello suele llevar una bombilla incorporada o bien capta la luz del exterior a través de un espejo.

El condensador: concentra los rayos de luz sobre la muestra.

La muestra: está montada sobre un portaobjetos y, normalmente, está fijada y teñida.


La lente: del ocular produce una segunda refracción y un segundo aumento del tamaño de la imagen.

Materiales:
Microscopio
Portaobjetos y cubreobjetos.
Muestra
(De ser necesario para la práctica kit de tinción de frotis sanguíneo)
Procedimiento:
1.- Colocar el objetivo con el menor aumento en posición de empleo y bajar la platina completamente.

2.- Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas



 3.- Comenzar la observación con el objetivo de 4x o colocar el de 10x.




4.- Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo macrométrico.

5.- Esto se debe de hacer mirando directamente y no desde el ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación pudiéndose dañar alguno de ellos o ambos.

6.- Mirando, ahora sí, atreves de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparación con el micrométrico hasta obtener un enfoque fino.
7.- Para realizar el enfoque; pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi fino, si al cambiar el objetivo se perdió por completo la imagen se recomienda regresar al de menor aumento para volver a enfocar

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despues de trabajar hay que divertirse
http://www.abcjuegos.net/juego/tentacle-wars





PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO, EMPLEANDO BALANZA GRANATARIA

 Introduccion: Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio.
 Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuadas, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad.
Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.

Conceptos

medios de cultivo: consiste en un gel o una solución que cuenta con los nutrientes necesarios para permitir el crecimiento de virus, microorganismos, células o incluso pequeñas plantas. Según qué se quiera hacer crecer, el medio requerirá unas u otras condiciones.

balanza: es una palanca de primer género de brazos iguales que mediante el establecimiento de una situación de equilibrio entre los pesos de dos cuerpos permite medir masas.

bacteria: Son seres generalmente unicelulares que pertenecen al grupo de los protistos inferiores. Son células de tamaño variable cuyo límite inferior está en las 0,2m y el superior en las 50m. son células procariotas (su núcleo está formado por un único cromosoma y carecen de membrana nuclear)
                                                       
                                                                 
                                             materiales                                                              
nota: se necesita material esterilizado si no sabes esterilizar favor de checar la practica
" esterilizacion por calor humedo"
1.-  medio de cultivo (dependera deque bacteria se quiera desarrollar)


2.- cajas de petril previamente esterilizadas ( dependiendo de cuantos medios desees realizar)


3.- matraz de erlenmeyer previamente esterilizado


4.- balanza granataria


5.- parrilla

6.- tapon para matraz previamente realizado y esterilizado

7.- agua destilada


 procedimiento

1.- medir con el matraz la cantidad de agua detilada necesaria (esto dependera de la cantidad de cajas de petril a usar y del tipo de medio de cultivo que se desee)
una caja de petril  equivale aproximadamente a 30 ml

2.- verificar que la balanza este calibrada si no lo esta se debera de calibrar
si no sabes calibrar la balanza solo debes girar tornillo nivelador hasta que el meñisco quede justo en la marca.



3.- pesar la cantidad necesaria del medio de cultivo
(esto dependera de la cantidad de agua y el medio de cultivo utilizado)



4.- vertir la cantidad pesada en el matraz y agitar


5.- seguir agitando constantemente  y colocar la suspencion en la parrilla para que llegue a su punto de ebullicion



6.- estar atento para el momento de que la mezcla llegue a su punto de ebullicion y retirar en ese momento de la parrilla para evitar que se queme y se derrame.


7.- esperar a que salga el humo del matraz y colocar el tapon


8.- introducir a la autoclave por 15 minutos a una presion de 15 LBS para esterilizar




9.- luego se retira de la autoclave y se vierte en las cajas de petril


10.- se deja gelificar a temperatura ambiente


11.- una vez gelificado se procede a guardar a una temperatura de 2° a 8° grados centigrados





listo la practica ha finalizado diviertete un rato con un monito y una balanza

INCUBACION DE MUESTRA DE EXUDADO FARINGEO, EMPLEANDO LA ESTUFA BACTERIOLOGICA

Introducción: El cultivo faríngeo es una prueba de laboratorio común para la identificación y el aislamiento de microorganismos que puedan causar una infección en la garganta. Esta se realiza para identificar causas de los malestares de garganta.

Conceptos:
Exudado faríngeo: Es una prueba de laboratorio que se hace para aislar e identificar microorganismos que puedan causar una infección en la garganta.
Cultivo bacteriológico: un cultivo es un método para la multiplicación de microorganismos, tales como bacterias , hongos y parásitos, en el que se prepara un medio óptimo para favorecer el proceso deseado.
Técnicas de siembra: se utiliza la técnica de pentágono en el agar bacteriológico.

Materiales:
Depresor de lengua
Torunda estéril
Placas de agar-sangre
Asa de siembra
Cinta adhesiva
Mechero de bunsen
Guantes.


Procedimiento:
1.- Se le solicitara al donador que incline la cabeza hacia atrás con la boca bien abierta. Se  frota con un hisopo o aplicador de algodón estéril a lo largo de la parte posterior de la garganta cerca de las amígdalas. El donador debe contener las náuseas y cerrar la boca mientras el aplicador toca esta área.

2.- Es posible que se necesite raspar varias veces esta área para buscar más microorganismos.
Nota. Puede que al momento de la practica la garganta duela o sienta nauseas pero el examen solo dura unos segundo.
3.- El segundo paso para la práctica es la siembra.
4.- Se procede a tomar un medio de cultivo y se procede a la siembra de la muestra recolectada con el hisopo. Se pasa suavemente por la superficie, cubriendo el área con la técnica de pentágono.

5.- Al finalizar se desecha la torunda en el contenedor de desechos orgánicos.
6.- El tercer paso es el aislamiento.
7.- Una vez realizada la técnica de pentágono se cierra con cinta adhesiva, se rotula la tapa indicando todos los datos del donante.

8.- Cuarto paso es la incubación y la observación.













9.- Se incuban las placas a incubar a 37oC, durante 24 horas. Tras este periodo se recogen las placas sin abrir se observa el crecimiento bacteriano.

10.- para terminar las cajas se meten a la autoclave y se esterilizan y luego el resto de material se desecha.